豬丹毒血清學(xué)診斷技術(shù)

 

    （1）血清培養(yǎng)凝集試驗  在3％胰蛋白胨肉膏湯（或肝化湯）中，加人（1；40）一（1：80）的丹毒高免血清，同時每毫升再加入400leg卡那霉素50／lg慶大霉素及2Stag萬古霉素（缺乏抗生素時，可加0．05％疊氦鈉及o．0005％結(jié)晶紫），制成丹毒血清抗生素診斷液（如分裝安瓿瓶管置4~C冰箱內(nèi)可至少保存2個月）。生前取病豬耳尖血1滴，死后則蘸取病料少許于安瓿瓶管內(nèi)，37~C培養(yǎng)14-24h。凡管底出現(xiàn)凝集顆粒或團塊時即判為陽性。

 

    （2）熒光抗體檢查法  用熒光素標(biāo)記的豬丹毒免疫球蛋白制成熒光抗體與病料涂片中的豬丹毒病菌發(fā)生特異性結(jié)合，在熒光顯微鏡下觀察，可見亮綠色菌體，即可判豬丹毒陽性，是豬丹毒快速檢疫的方法之一。

 

    （3）Dot-PAA-ELISA方法  肖國生、曹三杰、文心田等應(yīng)用Dot-PAA-ELISA方法快速檢測豬丹毒抗體。以豬丹毒CD3004（1a型）和C43-12（2型）菌株為抗原，EDTA滲透法提取的抗原作為膜載抗原，建立了Dot-PAA-ELISA檢測豬丹毒血清抗體方法，經(jīng)研究確定了Dot-PAA-ELISA的*工作條件。試驗制備的診斷膜片特異性強，不與豬瘟、豬偽狂犬病、豬肺疫、豬鏈球菌病、豬大腸桿菌病、仔豬副傷寒、豬布氏桿菌病、豬衣原體病的陽性血清發(fā)生交叉反應(yīng)；靈敏度高，能夠zui低檢出豬血清中含2161X10^-9g的豬IgG抗體；膜片保存期長，在室溫可保存4個月，4℃可保存7個月其檢測活性不變。用該方法檢測了仔豬免疫后抗體變化，并通過豬丹毒三型混合強毒攻毒試驗確定了豬能抗強毒攻擊的抗體臨界保護值為1：32。對336份血清進行豬丹毒抗體檢測，陽性檢出率為96．13％。試驗結(jié)果表明，本試驗方法操作簡便、快速準(zhǔn)確、結(jié)果可存檔、重復(fù)性和穩(wěn)定性好，所用試劑材料均可做到標(biāo)準(zhǔn)化，適合基層檢疫單位和養(yǎng)豬企業(yè)用于豬群免疫監(jiān)測和豬丹毒流行病學(xué)調(diào)查。